細胞色素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被人細胞色素C（Cyt-C）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人細胞色素C（Cyt-C）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
細胞色素試劑盒的使用方法：
1、樣品處理：
①液體食品：取約30m1樣品置于燒杯中，加熱除去酒精或二氧化碳，備用。
?、诠腆w食品：稱取搗碎的樣品約10克，置于燒杯中，加30m1水，搖勻后過濾，濾液備用。
2、測定：取一燒杯，加入處理后的樣品液10m1，加入檢測液A5滴，搖勻；用PH試紙沾取燒杯內(nèi)的液體檢查PH值是否在8-9之間，如未到，再滴入檢測液A調(diào)整到PH值在8-9之間，然后加檢測試棉B少許，令其浸入液體中，在90-100℃的水浴中加熱，1分鐘后攪拌試棉并將液體中的檢測試棉B取出，用清水漂洗試棉，如試棉染上的顏色不褪的為非食用色素。為便于判斷，可取檢測試棉B少許，用水浸濕后對比觀察。
細胞色素試劑盒的注意事項：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4、請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)。
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