NCI-H23人非小細胞肺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

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NCI-H205細胞，人腎上腺腺瘤細胞 牛腎細胞,MDBK (NBL-1)細胞 CL-0357HHCC(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 兔子基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

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EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 CaN  大鼠鈣調0酸酶 96T

5 MethylCytosine： 5甲基胞抗體 人脊髓星形膠質細胞總RNAHA-sp NA

NIH/3T3小鼠胚胎細胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛血清) 大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 IFN- Alpha(Human Interferon Alpha)  人α干擾素 96T

NCI-H23人非小細胞肺癌細胞CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽) 人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA 試劑盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原 0.5mg

HIP1： 亨廷頓(舞蹈癥)相互作用蛋白1抗體 PDK4 Others Mouse 小鼠 PDK4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL 人的幽門螺桿菌IgG(HP IgG)ELISA試劑盒 H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原 0.5mg

HAO1： 葡萄糖氧化酶1抗體 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6 羊膜細胞，WISH細胞 786-O [786-0](腎透明細胞腺癌細胞)

CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) 人的神經生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原 0.5mg

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。